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96孔PCR板在PCR擴增過程中需注意哪些事項?
PCR(聚合酶鏈式反應)是一項廣泛應用于現代生物學研究中的技術,可以在短時間內擴增特定DNA序列。96孔PCR板是其中重要的實驗器材之一,下面BUNSEN本生將介紹在其使用過程中需要注意的事項。
1、預處理
在進行PCR前,首先需要對96孔PCR板進行預處理。因為新制備出來的光滑塑料表面通常不容易與試劑液接觸并形成表面張力導致反應效率低下。因此,在使用前我們需要經過去臟、消毒和干燥等步驟。
2、填充
填充樣本時,保持操作臺整潔嚴肅;避免交叉污染;同時也需留意分配均勻樣品量準確無誤以及所選取植物組織是否具有代表性。
3、加蓋
加蓋后需輕輕壓平所有井至水平狀態(tài),并檢查各井間距是否相等,看上去像個正方形或者長方形而不是歪歪扭扭.
4、溫度控制
PCR過程中溫度較高,超出了許多試劑/化合物和工具質量可承擔的高溫范圍。因此,在實驗過程中,必須要嚴格控制反應溫度,并進行恰當的冷卻。
5、反應液體積
在加入反應液時,不要超出PCR板孔口的限制。另外還需注意各孔內反應液量是否均勻,避免空氣泡等情況影響擴增效果。
6、重復利用問題
為了更好地節(jié)約資源并保障環(huán)境安全,實驗室能否將96孔PCR板回收再利用?盡管這聽起來是一種可行性較高且環(huán)保的選擇,但是需要確保清晰化學物質殘留和消毒處理后再次使用;同時也需確保沒有任何污染或誤差會對下一輪實驗產生干擾影響.
總之,在使用96孔PCR板時,我們必須非常仔細地操作每一個步驟以及精準完成每個試劑藥品投料分配比例、時間點所任務;這樣可以幫助我們避免很多潛在風險和錯誤從而提供結果!
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